梯度PCR是指你的PCR儀在設置的時候可以同一時間不同位置設置一個從高到低的溫度梯度,以便在不知道退火溫度的情況下選擇一個最適宜的退火溫度。
二實時熒光定量PCR是通過再PCR過程中摻入熒光染料或釋放熒光基團,從而對模板進行相對定量或絕對定量的實驗,在實時熒光定量PCR時也可以設置梯度。
總的來說實時熒光定量PCR是一種實驗方法,而梯度PCR是一種實驗手段。
原理:
1、常規PCR 技術:
對PCR 擴增反應的終點產物進行定量和定性分析無法對起始模板準確定量,無法對擴增反應實時檢測。
2、實時定量PCR技術:
利用熒光信號的變化實時檢測PCR擴增反應中每一個循環擴增產物量的變化,通過Ct 值和標準曲線的分析對起始模板進行定量分析